分享一下鉬釩酸顯色液的配置方法

　　鉬釩酸顯色液有兩類：根據被檢物的化學組成是否遭受破壞，分為破壞性顯色液和非破壞性顯色液。
 

　　在實驗中我們一般將它調配成A，B兩種液體，當需要顯色時就分別加入A，B液，當混合液與實驗中復合物(抗原抗體復合物)反應就會產生顯色效果。
 

　　A液一般由：PBS緩沖液，檸檬酸，ED-TA乙二氨四乙酸，ProcLin-300，過氧化氫(過氧化氫揮發性太高，容易丟失，我們現在正用過氧化脲來代替，效果還不錯)組成。
 

　　B液一般由：PBS緩沖液，檸檬酸，ED-TA乙二氨四乙酸，ProcLin-300，硫代硫酸鈉等。
 

　　由于鉬釩酸顯色液的反應一旦開始就一直持續反應，所以，當達到理想效果時一定要終止反映，就需要加入終止液了。
 

　　鉬釩酸顯色液的配置方法：
 

　　試劑：
 

　　1)鹽酸(1+1水溶液)硝酸高氯酸
 

　　2)釩鉬酸銨顯色劑：稱取偏釩酸銨1.25g，加硝酸250ml，另稱取鉬酸銨25g，加水400ml加熱溶解，在冷卻的條件下，將兩種溶液混合，用水定容成1000ml。避光保存，若生成沉淀，則不能繼續使用。
 

　　3)磷標準液：將磷酸二氫鉀在105oC干燥1h，在干燥器中冷卻后稱取0.2195g溶解于水，定量轉入1000ml容量瓶中，加入硝酸3ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即為50mg/ml的磷標準液。
 

　　試樣的分解
 

　　干法：與Ca測定試樣的制備方法一致，在實際中，Ca，P使用同一分解液。
 

　　標準曲線的制備：
 

　　準確移取磷酸標準液，取0、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長下，用分光光度計測定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。
 

　　試樣的測定：
 

　　準確移取試樣分解液0.5ml—10ml(含磷量50—750mg)(實際中取0.5ml)于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸胺顯色劑10ml，按5的方法顯色和比色測定，測得試樣分解液的吸光度，用標準曲線查得試樣分解液的含磷量。一般先要將植物樣品的消化，再蒸餾、吸收和滴定。
 

　　測定N的話一般用凱氏法測定，測P一般用鉬藍比色法在分光光度計(72型)讀出消光值，對比標準曲線得出。